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你知道各种细胞培养基的区别吗?

2019/8/18 20:13:18发布241次查看

现代的细胞培养已经具有固定的培养基配方,如dmem、rpmi1640。它们大多属于经典培养基。它们是如何发展起来的?
许多人做实验只养一两种细胞,也许只遇到一两种培养基。但在历史上积累起来的经典培养基实际上已至少有十几种。回顾这些培养基,也许能看到前人为发展细胞培养而做出的一些努力。
zui早的经典培养基是bme,是由美国生理学家harry eagle(1905-1992)在1955年开发的,用于培养hela细胞和小鼠成纤维细胞。他发现了细胞体外生长所必需的*营养,这就是bme的配方。它由氨基酸、维生素、无机盐、d-葡萄糖和酚红组成。其中维生素有9种,氨基酸有13种,包括10种必需氨基酸、半胱氨酸、酪氨酸和谷氨酰胺。
bme之后出现了一种改良型,即mem。
mem可同时用于贴壁和悬浮细胞,可培养hela, bhk-21, 293, mcf-7细胞等。它是由harry eagle在bme配方基础上开发的。之后诞生了mem培养基的改良配方,如gmem、a-mem和dmem。
dmem即意大利生理学家dulbecco改良的engle培养基。dmem常用,能支持很多贴壁细胞生长,包括原代的成纤维细胞、神经元、huvecs、平滑肌细胞以及一些细胞系如hela(常用于癌症和信号转导研究)、293(常用于外源蛋白表达)、cos-7(常用于转染研究)等。
dmem所含维生素的浓度大约是mem的4倍,所含氨基酸大约比mem高1倍,氨基酸种类则多3种,可以说营养更为丰富。
gmem所含的氨基酸和维生素浓度比bme高1倍。它*初是mem加上10%的磷酸胰蛋白?,用于培养bhk-21细胞,以及用于研究影响细胞增殖能力的遗传因素。
a-mem也是mem的改良型,包括非必需氨基酸、丙酮酸钠、硫辛酸、维生素b12、生物素和抗坏血酸,可培养角质细胞、原代大鼠星形细胞等。
ham f-12培养基大约是在1965年由ham引入,用于无血清培养cho细胞(cho细胞是美国遗传学家theodore t.puck于1957年从一成年雌性仓鼠卵巢分离获得的,在生物工程上应用广泛)。和其他基础培养基相比,f-12含有的成分更广泛,包括锌、腐胺、次黄嘌呤和胸苷,还可用于培养软骨细胞和前列腺上皮细胞。
m199初是用于鸡胚成纤维细胞的营养研究。 它具有广泛的物种适用性,特别是用于培养未转化细胞。m199广泛用于病毒学和疫苗生产。与其他基础培养基相比,培养基199含有独特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黄嘌呤、胸腺嘧啶和其他维生素。
rpmi 1640主要用于培养悬浮细胞。它含有还原剂谷胱甘肽和高浓度维生素(如肌醇、胆碱),还包括生物素、维生素b12等mem、dmem没有包含的成分。
需要指出的是,经典培养基都不含蛋白质、脂类和生长因子,因此需要配合胎牛血清一起使用。

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